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《亲子鉴定师手记》讲述了以董宁书为代表的青年亲子鉴定师们，面对一个个来进行亲子鉴定的家庭，在一个个充满狗血的案例中破译温情，在小小的亲子鉴定所中上演着无数围绕亲子真相的修罗场，而这群年轻人也在这些案例中找到自己的人生方向，在最残酷的真相中，做出最人性的抉择。
夏中范的太太严氏因为不能生育，强占了女佣文玉，最终生下了儿子亦寒。然而，一个风雨交加的夜晚，文玉的旧情人文良潜入夏府，意外导致严氏身陷险境，甚至可能是导致她死亡的原因。光阴流逝，亦寒（许亚军 饰）成长为一名青年医生，在抢救银行家之子时结识了叶风荷（何晴 饰）。他们彼此相爱，但这段感情却引发了家庭内部的复杂情感纠葛，尤其是亦寒的表兄严绣莲对此情有独钟，但也备受痛苦。 在故事的发展中，谜团逐渐浮出水面：风荷的身份是谁？为何会出现两个绣莲？严氏的死究竟与谁有关？所有这些问题都加剧了男女主角以及家族成员之间的心理压力和冲突。最终，亦寒决定以一场大火来结束一切罪恶的象征。
蛇妖白素贞（鞠婧祎 饰）受观音点化，来到人间修行，遇见了在临安城行医的大夫许仙（于朦胧 饰）。刚开始，白素贞以为许仙是江湖骗子，于是和他进行了一场比试，比谁先治好长生的母亲的疾病。很快，白素贞就发现，长生的母亲中了蛇毒，追寻着这条线索，白素贞遇见了和自己一样在人间修炼的 青蛇 精小青（肖燕 饰），两人不打不相识，最终尽释前嫌结为姐妹。 临安城陆续发生了孩童失踪事件，和尚法海（裴子添 饰）发觉此为妖精所为，于是动身前往临安捉妖。法海将怀疑的目标锁定在了白素贞和小青的身上，对她们百般刁难。最终，大家才发现所有的事件都是蜈蚣精所为，青白二人协助法海，将蜈蚣精捉拿归案。
任晓雪（赵琳 饰）从离开北京前就已经打定了主意，上机前她就把手机里的SIM卡扔掉，随着飞机到达温哥华后更是气定神闲地摆脱掉考察团导游陆大洪（姜武 饰）的视线，消失了。陆大洪这可慌了神，一不小心就把留学生杨夕（李小冉 饰）给撞倒了，把杨夕送进医院后因为着急回酒店便匆匆留下名片走了。杨夕打电话让同学罗毅（陈坤 饰）过来探望自己。罗毅刚从中国过来，正在找房子。北京这边已经有人出发专程发到温哥华寻找晓雪的下落。而罗毅刚搬进新居就赫然发现对面屋子的女人正是晓雪！ 被找到的晓雪对罗毅、杨夕和陆大洪说了自己的经历，为了保护晓雪不再受到伤害，他们纷纷隐瞒了晓雪的消息。杨夕和大洪日久生情，但大洪的妻子即将要从国内过来，他们的感情面临关卡，杨夕十分痛苦。那边已经被晓雪深深吸引的罗毅也正备受折磨，他爱着晓雪的温柔与神秘，却又被这层神秘所折磨，他渴望晓雪能对他交出真心，但晓雪总是似有若无地有层隔膜。罗毅的父亲因为贪污而被捕，一下子所有的事情都堆积到罗毅头上，他的承受能力快到极限了……
